Variation der Fokusebenen zur 3D-Rekonstruktion weißer Blutkörperchen

Zusammenfassung

Für die Rekonstruktion mikroskopisch beobachtbarer Objekte sind aus der Literatur Verfahren bekannt, die aus mehreren lichtmikroskopischen Aufnahmen unterschiedlicher Fokussierung die Objektoberfläche rekonstruieren. Das sog. Shape-from-Focus-Verfahren berechnet dazu durch Maximierung eines Schärfemaßes für jede Pixelposition einen Höhenindex. Während diese Maximierung bei diffusen Ober-flächen gute Ergebnisse liefert, sind bei teilweise transparenten Objekten, wie beispielsweise weißen Blutkörperchen, Erweiterungen notwendig. Dieser Beitrag beschreibt Ansätze zur Verbesserung der Höhenkarte für diesen Anwendungsfall, die zum einen auf einer Median-Maximierung und zum anderen auf einem Differenzbildverfahren basieren. Zudem beschr änkt sich die Rekonstruktion bisher meist ausschließlich auf den Rekonstruktionsvorgang. Dieser Beitrag befasst sich zusätzlich mit der Verbesserung des Rekonstruktionsergebnisses durch gezielte Festlegung der Fokusserie. Die berechnete Höhenkarte wird schließlich als Punktwolke dreidimensional visualisiert.